Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Vav2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423656
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- Vav2 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico Vav2, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Vav2 Anticuerpo (F-6): sc-271442
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Vav2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-423656 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
Vav2 codifica un factor de intercambio de nucleótidos de guanina (GEF) para GTPasas de la familia Rho, conectando la señalización de receptores tirosina quinasa e integrinas con la activación de Rac1 y vías relacionadas. Al coordinar la remodelación del citoesqueleto de actina, la adhesión celular y el tráfico de membrana, VAV2 influye en la migración, el extendido celular y las respuestas dependientes de factores de crecimiento. En sistemas murinos, Vav2 se estudia en biología inmunitaria y vascular, así como en contextos neuronales y epiteliales donde la dinámica del citoesqueleto determina la homeostasis tisular. La desregulación de la señalización de VAV2 se ha implicado en fenotipos de proliferación e invasión aberrantes y se utiliza como un nodo mecanístico en modelos de señalización oncogénica e inflamatoria.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO Vav2 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Vav2 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Vav2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Vav2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Vav2.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Vav2 para la investigación de la señalización de Vav2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Vav2 críticos para la función de Vav2
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Vav2 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido Vav2 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido Vav2 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Vav2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Vav2 (m) y el plásmido HDR Vav2 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Vav2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Vav2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.