Vav Lentiviral Activation Particles (h): sc-400606-LAC

Das humane Gen **VAV1** kodiert Vav, einen hämatopoetischen Guanin-Nukleotid-Austauschfaktor, der Immunrezeptor- und Zytokinsignale mit GTPasen der Rho-Familie, darunter **RAC1** und **CDC42**, verknüpft. Nach einer Phosphorylierung downstream der TCR-/BCR- und Fc-Rezeptor-Signalwege koordiniert Vav die Umgestaltung des Aktin-Zytoskeletts, Integrinaktivierung, Calcium-Fluss und transkriptionelle Programme, die Entwicklung, Aktivierung und Effektorfunktion von Lymphozyten prägen. Die VAV1-Aktivität überschneidet sich mit der PI3K–AKT-, PLCγ- und MAPK-Signalgebung und reguliert so Zelladhäsion, Migration und die Bildung der immunologischen Synapse. Eine fehlregulierte VAV1-Signalgebung sowie Mutationen wurden mit Immunstörungen und onkogener Signalgebung bei hämatologischen Malignomen in Verbindung gebracht, was seinen Einsatz in Studien zu Signalnetzwerken des Immunsystems und Transformationsmechanismen unterstützt.

Vav Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente VAV1-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

Vav Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der VAV1-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen Vav-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen VAV1-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.