Plasmide CRISPR/Cas9 KO Vasorin (h): sc-404942
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Vasorin Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique Vasorin, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Vasorin Antibody (4G7): sc-517034
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO Vasorin (h) | sc-404942 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
VASN code la vasorine, une glycoprotéine transmembranaire de type I, fortement exprimée dans les cellules musculaires lisses vasculaires, qui module la signalisation extracellulaire à la surface cellulaire. Il a été rapporté que la vasorine se lie aux ligands du TGF-β et les séquestre, influençant ainsi des programmes transcriptionnels dépendants de SMAD qui régissent la prolifération cellulaire, la migration et le remodelage de la matrice extracellulaire. Par ces interactions, la vasorine contribue à l’homéostasie vasculaire et aux processus de remodelage tissulaire associés à l’athérosclérose, aux réponses aux lésions vasculaires et à des phénotypes liés à la fibrose. Une expression modifiée de VASN a également été observée dans plusieurs contextes tumoraux, ce qui appuie son utilisation dans des études sur la signalisation du microenvironnement et les transitions d’état cellulaire.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO Vasorin (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène VASN dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du VASN, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert VASN à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine Vasorin.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en VASN pour l'étude de la signalisation de Vasorin, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de VASN essentiels à la fonction de Vasorin
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de VASN pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le Vasorin plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le Vasorin plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus VASN. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le Vasorin plasmide HDR (h) et le Vasorin (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie VASN pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles VASN définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.