Vasohibin-1 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-403526

Panoramica

VASH1 codifica la vasohibina-1, un regolatore dell’angiogenesi di origine endoteliale indotto da segnali pro-angiogenici e coinvolto nel controllo a feedback negativo della formazione di nuovi vasi. La vasohibina-1 è stata associata alla modulazione della proliferazione e migrazione delle cellule endoteliali, al rimodellamento vascolare e alla dinamica dei microtubuli attraverso la sua attività di carbossipeptidasi della tubulina e le interazioni con cofattori quali SVBP. Un’alterata espressione di VASH1 è stata riportata nella vascolarizzazione associata ai tumori e in condizioni caratterizzate da neovascolarizzazione patologica e infiammazione cronica, a supporto della sua rilevanza negli studi sull’omeostasi vascolare. Di conseguenza, VASH1 è spesso analizzato nei pathway che regolano le risposte endoteliali allo stress, l’ischemia tissutale e la segnalazione extracellulare che modella il microambiente angiogenico.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO Vasohibin-1 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene VASH1 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del VASH1 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto VASH1 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina Vasohibin-1.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di VASH1 per lo studio della segnalazione di Vasohibin-1, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni VASH1 critici per la funzione di Vasohibin-1
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di VASH1 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal Vasohibin-1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal Vasohibin-1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus VASH1. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal Vasohibin-1 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR Vasohibin-1 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia VASH1 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio VASH1 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.