Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Uteroglobin/SCGB1A1/CC10 Double Nickase Plasmid (h): sc-400381-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das Uteroglobin/SCGB1A1/CC10 Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- Uteroglobin/SCGB1A1/CC10 Double-Nickase-Plasmid (h) und Uteroglobin/SCGB1A1/CC10 Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf SCGB1A1 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: Uteroglobin/SCGB1A1/CC10: sc-365992
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
Uteroglobin/SCGB1A1/CC10 Double Nickase Plasmid (h) | sc-400381-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Uteroglobin/SCGB1A1/CC10 Double Nickase Plasmid (h2) | sc-400381-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SCGB1A1 kodiert Uteroglobin (auch als CC10/CCSP bekannt), ein sezerniertes Mitglied der Secretoglobin-Familie, das überwiegend von Clubzellen der Atemwege und anderen mukosalen Epithelien produziert wird. Uteroglobin wirkt als antiinflammatorisches, immunmodulatorisches und mit antioxidativen Funktionen assoziiertes Protein, das die Homöostase der epithelialen Barriere beeinflussen und Reaktionen auf Umwelt-Schädigungen regulieren kann, unter anderem durch die Modulation von Zytokin-Signalwegen und eicosanoidbezogenen Prozessen. Die SCGB1A1-Expression wird häufig als Marker der Clubzell-Differenzierung und des Zustands des Atemwegsepithels verwendet und ist damit mit Signalwegen verknüpft, die die mukosale Abwehr, Gewebereparatur und die Regulation der angeborenen Immunantwort steuern. Veränderte SCGB1A1-Spiegel und eine Dysfunktion von Clubzellen werden im Kontext entzündlicher Atemwegserkrankungen, von Reaktionen auf Rauch- oder Schadstoffexposition sowie von epithelialen Remodelling-Phänotypen untersucht, die für Modelle von Atemwegserkrankungen relevant sind.
Uteroglobin/SCGB1A1/CC10 Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des SCGB1A1-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von SCGB1A1 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die SCGB1A1-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit SCGB1A1-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.