USP28 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-433446

Descripción general

Usp28 codifica la peptidasa específica de ubiquitina 28 (USP28), una enzima desubiquitinante que edita las cadenas de ubiquitina para regular la estabilidad y el recambio de proteínas. USP28 participa en procesos de control de calidad y señalización dependientes de ubiquitina que influyen en las respuestas al daño del ADN, la progresión del ciclo celular y los programas transcripcionales al controlar la abundancia de factores reguladores clave. A través de estas actividades, USP28 se estudia en vías relacionadas con la estabilidad del genoma, la señalización por estrés y la proteostasis. La función alterada de USP28 se ha asociado con proliferación desregulada y contextos de señalización oncogénica, lo que la hace relevante para estudios mecanísticos en biología del cáncer y modelos celulares relacionados.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO USP28 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Usp28 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Usp28 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Usp28 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína USP28.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Usp28 para la investigación de la señalización de USP28, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Usp28 críticos para la función de USP28
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Usp28 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido USP28 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido USP28 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Usp28. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR USP28 (m) y el plásmido HDR USP28 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Usp28 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Usp28 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.