USP12 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-406586

Übersicht

USP12 (Ubiquitin-spezifische Peptidase 12) ist ein deubiquitinierendes Enzym, das die Proteinstabilität und Signalübertragung reguliert, indem es Ubiquitin-Ketten von ausgewählten Substraten entfernt. Es wirkt an der ubiquitinabhängigen Kontrolle der zellulären Homöostase mit und beeinflusst durch die Modulation der Dynamik des Ubiquitin-Proteasom-Systems Prozesse wie Rezeptor-Trafficking, Stressantworten und Proteostase. Die Aktivität von USP12 wurde mit der Regulation zentraler Signal-Knoten in Verbindung gebracht, darunter Signalwege im Zusammenhang mit AKT- und Androgenrezeptor-Signaling, wodurch es an der kontextabhängigen Steuerung von Proliferation und transkriptionellen Programmen beteiligt ist. Eine Fehlregulation der USP12-Expression oder -Funktion wurde mit Tumorbiologie und anderen Erkrankungen assoziiert, bei denen eine veränderte Ubiquitin-Editierung Signalstärke und Proteinumsatz stört.

Das USP12 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des USP12-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des USP12-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von USP12 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die USP12-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von USP12-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der USP12-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf USP12-Exone abzielen, die für die USP12-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere USP12-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom USP12 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom USP12 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des USP12-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das USP12 HDR-Plasmid (h) und USP12 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von USP12-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten USP12-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.