Plasmide Double Nickase (m) uPAR: sc-422292-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) uPAR correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide uPAR Double Nickase (m) et le plasmide uPAR Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Plaur. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
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| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) uPAR | sc-422292-NIC | 20 µg | $410.00 |
Le gène murin *Plaur* code le récepteur de l’activateur du plasminogène de type urokinase (uPAR), un récepteur de surface cellulaire ancré par GPI qui localise la protéolyse en se liant à l’uPA et en coordonnant la génération de plasmine. uPAR fait le lien entre le remodelage de la matrice extracellulaire et l’adhésion/la migration cellulaires via des interactions avec les intégrines, la vitronectine et la signalisation des récepteurs à activité tyrosine kinase, influençant des voies qui régulent la dynamique du cytosquelette et l’activité des protéases péricellulaires. Cet axe est central pour le remodelage tissulaire, le trafic des cellules inflammatoires et les programmes de réparation des plaies, et il est fréquemment étudié dans des contextes où des réseaux de protéases et une signalisation stromale altérés remanient les microenvironnements. La biologie de Plaur/uPAR est donc pertinente pour des recherches mécanistiques sur la migration de type invasif, le remodelage associé à la fibrose et le recrutement des cellules immunitaires, sans impliquer de résultats thérapeutiques.
uPAR Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Plaur dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Plaur. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Plaur. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Plaur.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.