UGT2B5 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m): sc-423603

Übersicht

Maus-UGT2B5 ist eine mikrosomale UDP-Glucuronosyltransferase, die die Konjugation von Glucuronsäure an lipophile Substrate katalysiert und dadurch deren Wasserlöslichkeit für die Ausscheidung erhöht. Diese Phase-II-Metabolismusaktivität unterstützt die Elimination von Xenobiotika und trägt über die Glucuronidierung zur homöostatischen Kontrolle endogener kleiner Moleküle bei. Enzyme der UGT2B-Familie sind in hepatische und extrahepatische Entgiftungsprogramme eingebunden und können zelluläre Reaktionen auf chemische Exposition beeinflussen, indem sie die Substratverfügbarkeit und Metabolitenprofile modulieren. Eine veränderte Glucuronidierungskapazität wird häufig im Kontext der Toxikologie, entzündungsassoziierter metabolischer Umprogrammierung sowie genotypabhängiger Unterschiede in der Arzneistoffverarbeitung und chemischen Empfindlichkeit untersucht.

Das UGT2B5 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des Ugt2b5-Gens in mouse-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des Ugt2b5-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von Ugt2b5 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die UGT2B5-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von Ugt2b5-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der UGT2B5-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf Ugt2b5-Exone abzielen, die für die UGT2B5-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere Ugt2b5-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom UGT2B5 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) und vom UGT2B5 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des Ugt2b5-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das UGT2B5 HDR-Plasmid (m) und UGT2B5 HDR-Plasmid (m2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von Ugt2b5-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten Ugt2b5-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.