UGT2B17 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2): sc-405611-KO-2

Übersicht

UGT2B17 kodiert eine UDP-Glucuronosyltransferase, die die Phase-II-Glucuronidierung einer Vielzahl endogener und xenobiotischer Substrate katalysiert, deren Löslichkeit erhöht und damit ihre Elimination fördert. Dieses Enzym trägt zur Homöostase von Steroidhormonen und Gallensäuren bei und kann über hepatischen und extrahepatischen Stoffwechsel die zelluläre Exposition gegenüber bioaktiven und potenziell toxischen Metaboliten modulieren. Variationen in der UGT2B17-Expression oder der Kopienzahl wurden mit interindividuellen Unterschieden in der Androgenkonjugation und in Phänotypen des Arzneistoffmetabolismus in Verbindung gebracht, mit Bedeutung für die endokrinologische Forschung und die Pharmakogenomik. In experimentellen Systemen ist die UGT2B17-Aktivität in Entgiftungsnetzwerke eingebunden und beeinflusst durch Metaboliten getriebene Signalantworten.

Das UGT2B17 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des UGT2B17-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des UGT2B17-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von UGT2B17 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die UGT2B17-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von UGT2B17-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der UGT2B17-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf UGT2B17-Exone abzielen, die für die UGT2B17-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere UGT2B17-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom UGT2B17 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom UGT2B17 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des UGT2B17-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das UGT2B17 HDR-Plasmid (h) und UGT2B17 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von UGT2B17-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten UGT2B17-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.