Plasmide CRISPR/Cas9 KO UGT2B10 (h): sc-404210

Présentation

UGT2B10 code une UDP‑glucuronosyltransférase humaine qui catalyse des réactions de glucuronidation, augmentant la solubilité et facilitant l’élimination de métabolites endogènes et de xénobiotiques. En tant qu’enzyme métabolique de phase II, UGT2B10 contribue aux voies de détoxification hépatiques et extra‑hépatiques qui régulent l’homéostasie des petites molécules et les réponses de défense chimique. Des variations ou une expression modifiée de UGT2B10 peuvent déplacer les profils de conjugués glucuronides, avec des effets sur la pharmacocinétique, la signalisation médiée par les métabolites et les réponses cellulaires au stress. Ces propriétés font de UGT2B10 une cible pertinente pour l’étude du métabolisme des médicaments, de la biologie des expositions environnementales et des dérégulations métaboliques associées à des phénotypes pathologiques.

Le plasmide CRISPR/Cas9 KO UGT2B10 (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène UGT2B10 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du UGT2B10, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.

La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert UGT2B10 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine UGT2B10.

Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en UGT2B10 pour l'étude de la signalisation de UGT2B10, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.

Caractéristiques principales

• sgRNA ciblant le ou les exons de UGT2B10 essentiels à la fonction de UGT2B10
  Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
  Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
  Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de UGT2B10 pour améliorer l'efficacité du knock-out
  Compatible avec l'administration par transfection

Variantes de conception

CRISPR +/- HDR

• Les gRNA codés par le UGT2B10 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le UGT2B10 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus UGT2B10. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
  Les constructions donneuses HDR codées par le UGT2B10 plasmide HDR (h) et le UGT2B10 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie UGT2B10 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles UGT2B10 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.