UCK1 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-423608

개요

Uck1은 유리딘-시티딘 키나아제 1(UCK1)을 암호화하며, 이는 세포질에 존재하는 구제(salvage) 경로 효소로서 유리딘과 시티딘을 각각 UMP와 CMP로 인산화해 RNA 합성, DNA 복제, 막 인지질 대사에 필요한 피리미딘 뉴클레오타이드를 공급합니다. 뉴클레오타이드 풀의 균형을 조절함으로써 UCK1은 증식 능력, 세포주기 진행, 그리고 복제 및 전사 수요와 연관된 스트레스 반응에 영향을 미칩니다. 마우스 시스템에서는 뉴클레오타이드 항상성에서의 대사 재배선 및 보상적 플럭스를 이해하기 위해 UCK1 활성을 de novo 피리미딘 합성과 뉴클레오사이드 수송과 함께 흔히 분석합니다. 피리미딘 대사의 변화는 증식 조절 이상과 유전체 유지 장애가 관련된 질환에서 반복적으로 관찰되는 특징이므로, Uck1은 경로 중심의 기전 연구에 유용한 표적 노드가 됩니다.

UCK1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Uck1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Uck1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Uck1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 UCK1 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 UCK1 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Uck1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• UCK1 기능에 중요한 Uck1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Uck1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• UCK1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 UCK1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Uck1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  UCK1 HDR 플라스미드 (m) 및 UCK1 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Uck1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Uck1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.