Plasmide Double Nickase (h) UBE2G2: sc-404851-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) UBE2G2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide UBE2G2 Double Nickase (h) et le plasmide UBE2G2 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant UBE2G2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: UBE2G2 Antibody (D-4): sc-393780
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) UBE2G2 | sc-404851-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) UBE2G2 | sc-404851-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
UBE2G2 code une enzyme E2 de conjugaison de l’ubiquitine qui collabore avec des ligases E3 pour assembler des chaînes d’ubiquitine et réguler le renouvellement des protéines dépendant du protéasome. Il s’agit d’un composant clé de la dégradation associée au réticulum endoplasmique (ERAD), qui favorise l’élimination des protéines mal conformées ou en excès et contribue au maintien de la protéostasie en situation de stress cellulaire. En contrôlant la stabilité des substrats de manière dépendante de l’ubiquitination, UBE2G2 influence des voies liées à la réponse aux protéines mal repliées, à la régulation du cycle cellulaire et à l’amplitude des signaux. Une dérégulation de l’activité du système ubiquitine–protéasome et de l’ERAD a été associée à la biologie des cancers, aux maladies neurodégénératives et à des perturbations de la signalisation immunitaire, ce qui fait d’UBE2G2 un nœud pertinent pour des études mécanistiques du contrôle qualité des protéines.
UBE2G2 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus UBE2G2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de UBE2G2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de UBE2G2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de UBE2G2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.