Plásmido Doble Nickase (m) Tyro3: sc-423567-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)Tyro3 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Tyro3 (m) y el plásmido de doble nickasa Tyro3 (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Tyro3. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Tyro3 Anticuerpo (B-4): sc-166360
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) Tyro3 | sc-423567-NIC | 20 µg | $410.00 |
Tyro3 codifica una tirosina quinasa receptora de la familia TAM que se une a los ligandos GAS6 y proteína S para regular la supervivencia celular, la proliferación y la eliminación fagocítica de células apoptóticas. En tejidos de ratón, la señalización de TYRO3 activa las vías PI3K–AKT y MAPK/ERK y se integra con programas de homeostasis inmunitaria que limitan la señalización inflamatoria y favorecen la remodelación tisular. Este receptor está implicado en el mantenimiento neuronal y la función sináptica, así como en la regulación de células mieloides dentro del sistema inmunitario innato. La actividad desregulada de los receptores TAM, incluido TYRO3, se ha asociado con alteraciones en la tolerancia inmunitaria y se ha estudiado en contextos de inflamación crónica, autoinmunidad y redes de señalización relacionadas con el cáncer.
Tyro3 El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Tyro3 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Tyro3. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Tyro3. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Tyro3 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.