TSPYL1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m): sc-423529

Übersicht

Tspyl1 kodiert TSPYL1, ein Mitglied der Nucleosome-Assembly-Protein-(NAP)-Familie, das an der Chromatinorganisation und der Regulation der Transkription beteiligt ist. In Mauszellen wurde TSPYL1 mit der Kontrolle des Zellzyklus-Fortschritts und der Differenzierung über epigenetische Modulation von Genexpressionsprogrammen in Verbindung gebracht und beeinflusst dabei Prozesse wie DNA-abhängige Transkription und Chromatinzugänglichkeit. Durch die Prägung von Chromatinzuständen kann TSPYL1 Signalwege beeinflussen, die Proliferation und zelluläre Stressantworten steuern, was es für Studien zu Entwicklungsphänotypen und Mechanismen der onkogenen Transformation relevant macht. Eine Fehlregulation von Proteinen der TSPYL-Familie wurde mit veränderter Wachstumskontrolle und krankheitsrelevanten Transkriptionssignaturen assoziiert, was seinen Einsatz als Ziel in der funktionellen Genomik unterstützt.

Das TSPYL1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des Tspyl1-Gens in mouse-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des Tspyl1-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von Tspyl1 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die TSPYL1-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von Tspyl1-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der TSPYL1-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf Tspyl1-Exone abzielen, die für die TSPYL1-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere Tspyl1-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom TSPYL1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) und vom TSPYL1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des Tspyl1-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das TSPYL1 HDR-Plasmid (m) und TSPYL1 HDR-Plasmid (m2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von Tspyl1-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten Tspyl1-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.