TSPAN18 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-405937

Übersicht

TSPAN18 kodiert ein Membranprotein der Tetraspanin-Familie, das zur Organisation tetraspaninangereicherter Mikrodomainen beiträgt und laterale Interaktionen zwischen Rezeptoren, Adhäsionsmolekülen und Signaladapterproteinen an der Plasmamembran koordiniert. Über diese Gerüstfunktionen kann TSPAN18 Prozesse wie Zell-Zell-Kommunikation, Membrantransport und Signalintegration beeinflussen, die Programme der zellulären Aktivierung und Motilität prägen. In der Literatur wurden die Expression und genetische Variation von Tetraspaninen, einschließlich TSPAN18, mit thrombozytenbezogenen Phänotypen und der Gefäßbiologie in Verbindung gebracht, was den Einsatz dieses Targets in Studien zu hämostaseassoziierter Signalübertragung und Entzündungsreaktionen unterstützt. Die Aufklärung der TSPAN18-Funktion kann verdeutlichen, wie die Zusammensetzung von Membranmikrodomänen nachgeschaltete Signalwege moduliert, die für kardiovaskuläre und immunassoziierte Krankheitsmechanismen relevant sind.

Das TSPAN18 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des TSPAN18-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des TSPAN18-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von TSPAN18 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die TSPAN18-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von TSPAN18-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der TSPAN18-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf TSPAN18-Exone abzielen, die für die TSPAN18-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere TSPAN18-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom TSPAN18 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom TSPAN18 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des TSPAN18-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das TSPAN18 HDR-Plasmid (h) und TSPAN18 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von TSPAN18-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten TSPAN18-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.