tropomodulin 1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423427
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- tropomodulin 1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico tropomodulin 1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
tropomodulin 1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-423427 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O gene Tmod1 de camundongo codifica a tropomodulina 1, uma proteína que se liga à extremidade pontiaguda dos filamentos de actina, atuando como “tampão”, e que coopera com a tropomiosina para estabilizar e definir o comprimento dos filamentos em redes citoesqueléticas diferenciadas. Ao limitar a troca de subunidades de actina nas extremidades pontiagudas, a Tmod1 contribui para a organização das miofibrilas, a arquitetura da actina associada à membrana e a remodelação celular dependente de tensão. Essas funções posicionam a Tmod1 em vias que regulam a dinâmica do citoesqueleto de actina, a montagem do sarcômero e o controle da forma celular. A regulação alterada da estabilidade dos filamentos de actina é amplamente relevante para estudos sobre estrutura muscular e disfunção contrátil, bem como sobre contribuições do citoesqueleto para a motilidade celular e a mecanobiologia.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO tropomodulin 1 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Tmod1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Tmod1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Tmod1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína tropomodulin 1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Tmod1 para a investigação da sinalização de tropomodulin 1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Tmod1 críticos para a função tropomodulin 1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Tmod1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo tropomodulin 1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo tropomodulin 1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Tmod1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo tropomodulin 1 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR tropomodulin 1 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Tmod1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Tmod1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.