Tris Buffered Saline with Tween 20: 5 L of 20X

Tris-gepufferte Kochsalzlösung mit Tween 20 (TBST), insbesondere in einer konzentrierten 20-fachen Lösung, wird in der biochemischen und molekularbiologischen Forschung häufig als Waschpuffer und als Basis für die Verdünnung von Antikörpern und anderen Proteinen verwendet. TBST kombiniert die Pufferkapazität von Tris (Tris(hydroxymethyl)aminomethan) mit der Ionenstärke und Osmolaritätskontrolle von Kochsalzlösung (Natriumchlorid) und den Tensideigenschaften von Tween 20. Die Hauptaufgabe von Tris in TBST besteht darin, einen stabilen pH-Wert aufrechtzuerhalten, der für die Gewährleistung der strukturellen Integrität und Funktionalität von Proteinen während der Experimente entscheidend ist. Die Kochsalzlösung erhöht den Nutzen dieser Lösung, indem sie ein ionisches Milieu bietet, das dem vieler biologischer Systeme ähnelt, was für die Aufrechterhaltung der Proteinlöslichkeit und die Verringerung unspezifischer Wechselwirkungen wichtig ist. Tween 20, ein nichtionisches Tensid, ist enthalten, um die Oberflächenspannung zu verringern und die Benetzungseigenschaften des Puffers zu verbessern. Dies ist besonders nützlich bei immunologischen Tests wie Western Blotting, ELISA (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay) und Immunfärbung, wo es dazu beiträgt, unspezifische Bindungen und Hintergrundrauschen zu reduzieren und so das Signal-Rausch-Verhältnis zu verbessern. Tween 20 hilft bei der Permeabilisierung von Zellmembranen und Geweben und ermöglicht so einen effektiveren Zugang der Antikörper zu intrazellulären und membrangebundenen Proteinen. In der Forschung wird TBST vor allem bei den Waschschritten dieser Assays eingesetzt, wo es überschüssige Antikörper und ungebundene Proteine entfernt, ohne die zielgebundenen Antikörper zu entfernen. Dieses präzise Gleichgewicht von Pufferung, Ionenstärke und Tensidwirkung macht TBST zu einem unverzichtbaren Werkzeug bei der detaillierten Analyse von Proteininteraktionen und -funktionen.