Tris Buffered Saline with Tween 20: 1 L of 10X

Tris gepufferte Kochsalzlösung mit Tween 20 (TBST) ist eine wichtige Pufferlösung, die in der molekularbiologischen und biochemischen Forschung weit verbreitet ist. Sie enthält Tris (Tris(hydroxymethyl)aminomethan), Kochsalzlösung (Natriumchlorid) und Tween 20, ein nichtionisches Tensid. Diese Kombination ist entscheidend für die Aufrechterhaltung eines pH-Werts von 7,4 bis 7,6, der für die meisten biologischen Prozesse ideal ist, sowie für die Gewährleistung der richtigen Osmolarität und Ionenstärke, die physiologische Bedingungen widerspiegeln. Die Zugabe von Tween 20 in TBST ist besonders wichtig. Tween 20 wirkt als Detergens, reduziert die Oberflächenspannung und trägt zur Permeabilisierung von Zellmembranen bei. Diese Eigenschaft ist besonders wertvoll bei immunologischen Tests wie Western Blotting, Enzyme-Linked Immunosorbent Assays (ELISA) und Immunhistochemie. Bei diesen Anwendungen wird TBST zum Waschen von Schnitten und Membranen verwendet, wodurch ungebundene Antikörper effektiv entfernt und unspezifische Bindungen minimiert werden. Dies trägt dazu bei, klarere und spezifischere Signale zu erhalten, indem das Hintergrundrauschen reduziert und so die Nachweisempfindlichkeit der Zielproteine oder -antigene erhöht wird. Außerdem wird TBST in diesen Protokollen häufig als Blockierungsmittel verwendet. Es blockiert potenzielle unspezifische Bindungsstellen, wodurch die Spezifität und Klarheit der Testergebnisse weiter verbessert wird. Die Fähigkeit dieses Puffers, die Stabilität von Proteinen aufrechtzuerhalten und die Bindungsspezifität von Antikörpern unter experimentellen Bedingungen zu unterstützen, macht ihn bei detaillierten Proteininteraktionsstudien und anderen molekularen Diagnosen unverzichtbar.