Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
TRIP6 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423507
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- TRIP6 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico TRIP6, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: TRIP6 Anticuerpo (F-8): sc-166310
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
TRIP6 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-423507 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
Trip6 codifica TRIP6, una proteína adaptadora que contiene dominios LIM y que se localiza en las adhesiones focales y en el citoesqueleto de actina para coordinar la señalización de integrinas, la remodelación del citoesqueleto y las respuestas transcripcionales. TRIP6 funciona como andamiaje para quinasas y complejos de señalización, vinculando las vías de GTPasas de la familia Rho y el recambio de adhesiones focales con la regulación de la adhesión, el esparcimiento y la migración celular. A través de interacciones con socios citosqueléticos y nucleares, contribuye a la mecanotransducción y a la modulación de programas de expresión génica que determinan las respuestas celulares a señales de la matriz extracelular. La desregulación de las redes de adhesión y motilidad asociadas a TRIP6 es relevante para estudiar fenotipos invasivos y procesos de remodelación tisular en modelos pertinentes para enfermedades.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO TRIP6 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Trip6 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Trip6 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Trip6 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína TRIP6.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Trip6 para la investigación de la señalización de TRIP6, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Trip6 críticos para la función de TRIP6
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Trip6 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido TRIP6 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido TRIP6 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Trip6. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR TRIP6 (m) y el plásmido HDR TRIP6 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Trip6 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Trip6 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.