Plásmido Doble Nickase (h) TRIM2: sc-410495-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)TRIM2 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa TRIM2 (h) y el plásmido de doble nickasa TRIM2 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a TRIM2. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) TRIM2 | sc-410495-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) TRIM2 | sc-410495-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TRIM2 codifica una ligasa E3 de ubiquitina con motivo tripartito, implicada en el recambio de proteínas dependiente de ubiquitina y en la organización del citoesqueleto, con funciones destacadas en el mantenimiento neuronal. A través de sus dominios RING, B-box y de hélice enrollada (coiled-coil), TRIM2 participa en rutas de proteostasis y de respuesta al estrés que influyen en la integridad axonal, la función sináptica y el tráfico intracelular. Las alteraciones en la actividad de TRIM2 se han asociado con fenotipos del neurodesarrollo y neurodegenerativos, en consonancia con su enriquecimiento en el sistema nervioso y su implicación en la regulación de la estabilidad de sustratos neuronales clave. Estas propiedades convierten a TRIM2 en un nodo útil para estudiar la regulación del sistema ubiquitina–proteasoma, la dinámica del citoesqueleto y los mecanismos de vulnerabilidad específicos de ciertos tipos celulares.
TRIM2 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus TRIM2 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de TRIM2. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de TRIM2. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con TRIM2 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.