Plasmide CRISPR/Cas9 KO TRIL (h): sc-406056

Présentation

TRIL (interacteur de TLR4 à répétitions riches en leucine) est une protéine accessoire transmembranaire qui module la signalisation de l’immunité innée en facilitant les réponses dépendantes du récepteur Toll-like 4 (TLR4), en particulier dans la microglie et d’autres contextes de la lignée myéloïde. Par des interactions qui soutiennent le trafic du récepteur et la réactivité aux ligands, TRIL influence les voies en aval liées à MyD88 et à TRIF, conduisant aux programmes transcriptionnels de NF-κB et des IRF. Son activité contribue à la régulation de la production de cytokines et d’interférons, façonnant les réseaux de signalisation neuro-inflammatoires et inflammatoires. Une signalisation associée à TRIL dérégulée a été étudiée dans le cadre de mécanismes inflammatoires et neuro-inflammatoires pertinents pour des troubles dans lesquels des réponses pilotées par TLR4 sont impliquées.

Le plasmide CRISPR/Cas9 KO TRIL (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène TRIL dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du TRIL, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.

La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert TRIL à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine TRIL.

Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en TRIL pour l'étude de la signalisation de TRIL, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.

Caractéristiques principales

• sgRNA ciblant le ou les exons de TRIL essentiels à la fonction de TRIL
  Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
  Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
  Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de TRIL pour améliorer l'efficacité du knock-out
  Compatible avec l'administration par transfection

Variantes de conception

CRISPR +/- HDR

• Les gRNA codés par le TRIL plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le TRIL plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus TRIL. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
  Les constructions donneuses HDR codées par le TRIL plasmide HDR (h) et le TRIL (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie TRIL pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles TRIL définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.