TRF2 Lentiviral Activation Particles (h): sc-401289-LAC

TERF2 kodiert den telomerischen Repeat-Bindungsfaktor 2 (TRF2), eine zentrale Komponente des Shelterin-Komplexes, der an doppelsträngige telomerische DNA bindet und so die Integrität der Chromosomenenden bewahrt. TRF2 unterdrückt eine fehlgeleitete, ATM-abhängige DNA-Schadenssignalgebung sowie das klassische nicht-homologe End-Joining (NHEJ) an Telomeren und verhindert dadurch Telomer-End-zu-End-Fusionen und erhält die Genomstabilität während der Replikation. Durch die Koordination der Bildung der Telomerschleife (T-Loop) und der Telomerreplikation beeinflusst TRF2 den Zellzyklusverlauf, die Replikationskapazität und Seneszenzprogramme. Eine dysregulierte TERF2/TRF2-Funktion wird mit Telomer-Dysfunktion, chromosomaler Instabilität und veränderten DNA-Schadensantworten in Zusammenhang gebracht, was für Untersuchungen zu Krebsbiologie, Altern und telomerbezogenen Störungen der Genomerhaltung relevant ist.

TRF2 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente TERF2-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

TRF2 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der TERF2-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen TRF2-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen TERF2-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.