Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
TREX-1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423502
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- TREX-1 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico TREX-1, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: TREX-1 Anticuerpo (C-11): sc-133112
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
TREX-1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-423502 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
Trex1 codifica TREX-1, una exonucleasa de ADN 3′→5′ que degrada ADN citosólico aberrante originado por retroelementos endógenos, estrés de replicación o daño en el ADN, limitando así la activación inapropiada de sensores inmunitarios innatos. Al restringir la señalización de cGAS–STING y los programas transcripcionales de interferón de tipo I aguas abajo, TREX-1 ayuda a mantener la homeostasis inmunitaria y previene respuestas inflamatorias crónicas frente a ácidos nucleicos propios. En sistemas murinos, la pérdida de Trex1 se utiliza habitualmente para modelar la autoinflamación impulsada por ácidos nucleicos y para estudiar mecanismos que vinculan la inestabilidad genómica, las vías de muerte celular y la expresión de genes estimulados por interferón. La actividad de TREX-1 también se relaciona con procesos de reparación del ADN y asociados a la replicación, por lo que es relevante para estudios de estrés genotóxico y vigilancia inmunitaria.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO TREX-1 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Trex1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Trex1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Trex1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína TREX-1.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Trex1 para la investigación de la señalización de TREX-1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Trex1 críticos para la función de TREX-1
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Trex1 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido TREX-1 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido TREX-1 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Trex1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR TREX-1 (m) y el plásmido HDR TREX-1 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Trex1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Trex1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.