TRB-1 Lentiviral Activation Particles (h): sc-405781-LAC

TRIB1 (TRB-1) kodiert ein Pseudokinase-Adapterprotein, das die MAPK-Signalübertragung und transkriptionelle Programme moduliert, indem es als Gerüst (Scaffold) für Protein-Protein-Interaktionen dient und den proteasomabhängigen Abbau von Signalregulatoren beeinflusst. In immunologischen und metabolischen Kontexten ist TRB-1 an Signalwegen beteiligt, die mit inflammatorischer Signalgebung, myeloider Differenzierung und Lipidhomöostase verknüpft sind, und integriert dabei Signale, die den Zellzustand sowie Stressantworten beeinflussen. Eine veränderte TRIB1-Expression wurde mit dysregulierten hämatopoetischen Programmen und kardiometabolischen Merkmalen in Verbindung gebracht, was TRIB1 zu einem nützlichen Ziel für die Analyse kontextabhängiger Transkriptions- und Signalnetzwerke macht. Funktionelle Studien nutzen häufig eine Perturbation von TRB-1, um Eingänge aus upstream gelegenen Signalwegen mit nachgeschalteten Änderungen der Genexpression und Phänotyp-Readouts wie Proliferation, Differenzierung und Zytokinantworten zu verknüpfen.

TRB-1 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente TRIB1-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

TRB-1 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der TRIB1-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen TRB-1-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen TRIB1-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.