TRAF7 Double Nickase Plasmid (h): sc-404992-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das TRAF7 Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- TRAF7 Double-Nickase-Plasmid (h) und TRAF7 Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf TRAF7 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
TRAF7 Double Nickase Plasmid (h) | sc-404992-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
TRAF7 Double Nickase Plasmid (h2) | sc-404992-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Das humane TRAF7 kodiert eine E3-Ubiquitin-Ligase der TRAF-Familie, die Signalintermediate als Gerüstprotein organisiert und ubiquitiniert, um entzündliche und stressantwortende Signalwege zu modulieren. Über Interaktionen mit MAPK-Komponenten und NF-κB-assoziierten Regulatoren trägt TRAF7 zur Koordination von Proteostase, transkriptionellen Antworten und Entscheidungen über das Zellschicksal bei, einschließlich Apoptose in bestimmten Kontexten. TRAF7 wurde mit der Kontrolle ubiquitinabhängiger Signalausgänge sowie mit Cross-Talk zu Signalwegen in Verbindung gebracht, die die Zytoskelettorganisation und die zelluläre Homöostase steuern. Wiederkehrende TRAF7-Veränderungen wurden bei mehreren Tumorarten beschrieben, was seine Relevanz für die Untersuchung einer Fehlregulation der Ubiquitin-Signalgebung in krankheitsassoziierten Zellzuständen unterstreicht.
TRAF7 Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des TRAF7-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von TRAF7 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die TRAF7-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit TRAF7-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.