Towbin, without SDS, 10X

Der 10-fache Towbin-Puffer ohne SDS (Natriumdodecylsulfat) ist ein zentrales Reagenz in der molekularbiologischen Forschung, das vor allem bei Proteinanalysetechniken wie der nativen PAGE (Polyacrylamid-Gelelektrophorese) und bestimmten Proteintransfermethoden eingesetzt wird. Dieser Puffer spielt eine grundlegende Rolle bei der Aufrechterhaltung der nativen Struktur und Ladung von Proteinen und ermöglicht deren Trennung nach Größe oder Ladung ohne Denaturierung. Die Zusammensetzung des 10-fachen Towbin-Puffers umfasst in der Regel Tris-Base und Glycin. Tris-Base dient als Puffer und sorgt für einen stabilen pH-Wert, der die Elektrophorese begünstigt. Glycin verbessert die Trennauflösung, indem es einen Gradienteneffekt im Gel erzeugt. In der Forschung ist der 10-fache Towbin-Puffer von entscheidender Bedeutung für die Probenvorbereitung, insbesondere wenn die native Struktur und Ladung der Proteine erhalten bleiben soll. Im Gegensatz zu SDS-haltigen Puffern denaturiert Towbin Buffer ohne SDS die Proteine nicht und unterbricht keine Disulfidbindungen. Stattdessen bietet er eine Umgebung, in der Proteine ihre tertiären und quaternären Strukturen beibehalten. Wissenschaftler verwenden Towbin Buffer, 10X, ohne SDS, in Techniken wie der nativen PAGE, um Proteine auf der Grundlage ihrer Größe und Ladung zu trennen, während ihre natürlichen Konformationen erhalten bleiben. Dies ist besonders nützlich für die Untersuchung von Proteinkomplexen, Oligomeren oder Proteinen mit komplizierten dreidimensionalen Strukturen. Darüber hinaus wird der 10-fache Towbin-Puffer ohne SDS bei bestimmten Proteintransfermethoden eingesetzt, z. B. bei halbtrockenen oder tankbasierten Transfersystemen. Bei diesen Methoden werden die Proteine unter Beibehaltung ihrer nativen Struktur von einem Gel auf eine Membran übertragen, so dass eine anschließende Detektion oder Analyse ohne Protein-Renaturierungsschritte möglich ist.