TMEM192 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-415021-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- TMEM192O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase TMEM192 (h) e o Plasmídeo Double Nickase TMEM192 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para TMEM192. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:TMEM192 Anticorpo (F-12): sc-518207
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
TMEM192 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-415021-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
TMEM192 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-415021-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TMEM192 codifica uma proteína transmembranar de múltiplas passagens, enriquecida nas membranas lisossomais e implicada na manutenção da identidade do lisossomo, da organização da membrana e da homeostase proteolítica. Ao influenciar o tráfego e a renovação lisossomal, o TMEM192 se cruza com vias que controlam a maturação endolisossomal, a função autofagia–lisossomo e respostas ao estresse celular. A desregulação da dinâmica lisossomal é amplamente relevante para a neurodegeneração, a biologia de infecções e o metabolismo de células cancerosas, tornando o TMEM192 um alvo útil para investigar como processos dependentes de lisossomos moldam a fisiologia celular. Em modelos de células humanas, a perturbação de TMEM192 pode ajudar a esclarecer ligações entre a composição da membrana lisossomal e redes de sinalização catabólica a jusante.
TMEM192 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus TMEM192 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de TMEM192. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função TMEM192. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com TMEM192 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.