TMEM132C CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m): sc-431553

Übersicht

Tmem132c kodiert TMEM132C, ein vorhergesagtes multipass-Transmembranprotein, das an Zellmembranen lokalisiert und vermutlich zur Organisation der Zelloberfläche sowie zur membranassoziierten Signalübertragung beiträgt. Mitglieder der TMEM132-Familie werden mit der Regulation von Zelladhäsion und Zytoskelettdynamik in Verbindung gebracht, was auf Rollen in der Gewebearchitektur und der neuronalen oder epithelialen Homöostase hindeutet. In Mausmodellen sprechen die Expressionsmuster von Tmem132c dafür, zu untersuchen, wie Membranproteine die zelluläre Konnektivität und Stressantworten während der Entwicklung und in der adulten Physiologie modulieren. Die Fehlregulation transmembraner Adhäsions- und Signalmodule wird häufig in Studien zur Neurobiologie und zur Genetik komplexer Erkrankungen untersucht, wodurch TMEM132C ein nützliches Ziel für die mechanistische Analyse von Signalwegen darstellt.

Das TMEM132C CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des Tmem132c-Gens in mouse-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des Tmem132c-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von Tmem132c nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die TMEM132C-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von Tmem132c-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der TMEM132C-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf Tmem132c-Exone abzielen, die für die TMEM132C-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere Tmem132c-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom TMEM132C CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) und vom TMEM132C CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des Tmem132c-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das TMEM132C HDR-Plasmid (m) und TMEM132C HDR-Plasmid (m2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von Tmem132c-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten Tmem132c-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.