TM4SF19 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-406884

Übersicht

TM4SF19 (Transmembran-4-L-Sechs-Familienmitglied 19) kodiert ein tetraspaninähnliches Membranprotein, dem eine Rolle bei der Organisation von Membran-Mikrodomänen und der Modulation von Zell-Zell- bzw. Zell-Matrix-Interaktionen zugeschrieben wird. Als Mitglied der TM4SF-Familie ist TM4SF19 mit Prozessen wie Rezeptor-Clusterbildung, Signaltransduktion an der Plasmamembran und der Regulation adhäsionsassoziierter Signalwege verbunden, die Migration und epitheliale Organisation beeinflussen. Eine veränderte Expression von TM4SF-Proteinen wurde in zahlreichen Krebskontexten beschrieben, was die Untersuchung von TM4SF19 in der Tumorbiologie, bei Invasionsphänotypen und in der Signalgebung der Mikroumgebung nahelegt. Studien zur Perturbation von TM4SF19 können zudem Einblicke in Mechanismen des Membranprotein-Transports und in die Zusammensetzung des Surfaceoms in menschlichen Zellen liefern.

Das TM4SF19 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des TM4SF19-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des TM4SF19-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von TM4SF19 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die TM4SF19-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von TM4SF19-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der TM4SF19-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf TM4SF19-Exone abzielen, die für die TM4SF19-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere TM4SF19-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom TM4SF19 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom TM4SF19 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des TM4SF19-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das TM4SF19 HDR-Plasmid (h) und TM4SF19 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von TM4SF19-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten TM4SF19-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.