TLR8 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-431303

概要

Tlr8は、Toll様受容体8（TLR8）をコードしており、病原体由来の一本鎖RNAや一部の合成アゴニストを検知して自然免疫シグナル伝達を開始する、エンドソーム局在のパターン認識受容体です。活性化されると、TLR8はMYD88依存性のカスケードを介してNF-κBおよびMAPK経路へとシグナルを収束させ、炎症性サイトカインや共刺激分子の発現プログラムを誘導して、骨髄系およびリンパ系の免疫応答を形成します。マウスでは、TLR8はサイトカインバランスの調節や、エンドソームで核酸を感知する受容体間のクロストークに関与し、抗原提示およびその後の獲得免疫にも影響を及ぼします。TLR8関連シグナルの制御不全は、炎症表現型や宿主防御の変化と関連づけられており、感染生物学、自己免疫の機序、免疫代謝ストレスの研究において重要です。

TLR8 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるTlr8遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Tlr8内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Tlr8のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、TLR8タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、TLR8シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Tlr8欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• TLR8の機能に不可欠なTlr8エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Tlr8ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• TLR8 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびTLR8 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Tlr8遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  TLR8 HDRプラスミド（m）および TLR8 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはTlr8ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のTlr8標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。