Plasmide CRISPR/Cas9 KO TLR6 (m): sc-423420

Présentation

Tlr6 code le récepteur Toll-like 6 (TLR6), un récepteur de reconnaissance des motifs (PRR) qui forme des hétérodimères fonctionnels avec TLR2 afin de détecter les lipopeptides microbiens à la surface cellulaire et d’initier la signalisation de l’immunité innée. Après liaison du ligand, TLR6 recrute des protéines adaptatrices telles que MYD88 pour activer la cascade IRAK–TRAF6, entraînant l’activation des voies NF-κB et MAPK ainsi que l’induction de cytokines et de chimiokines inflammatoires. Dans les compartiments myéloïdes et épithéliaux de la souris, TLR6 contribue à façonner les réponses antimicrobiennes et à moduler le dialogue entre l’immunité innée et l’immunité adaptative. Une signalisation dépendante de TLR6 dérégulée a été impliquée dans la physiopathologie inflammatoire, notamment via des réponses altérées dans des modèles d’infection, d’inflammation des voies aériennes et d’inflammation métabolique.

Le plasmide CRISPR/Cas9 KO TLR6 (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Tlr6 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Tlr6, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.

La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Tlr6 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine TLR6.

Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Tlr6 pour l'étude de la signalisation de TLR6, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.

Caractéristiques principales

• sgRNA ciblant le ou les exons de Tlr6 essentiels à la fonction de TLR6
  Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
  Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
  Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Tlr6 pour améliorer l'efficacité du knock-out
  Compatible avec l'administration par transfection

Variantes de conception

CRISPR +/- HDR

• Les gRNA codés par le TLR6 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le TLR6 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Tlr6. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
  Les constructions donneuses HDR codées par le TLR6 plasmide HDR (m) et le TLR6 (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Tlr6 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Tlr6 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.