Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plásmido Doble Nickase (h) TLR5: sc-401154-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)TLR5 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa TLR5 (h) y el plásmido de doble nickasa TLR5 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a TLR5. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: TLR5 Anticuerpo (H-11): sc-518106
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) TLR5 | sc-401154-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) TLR5 | sc-401154-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
El receptor tipo Toll 5 (TLR5) es un receptor de reconocimiento de patrones localizado en la superficie celular que detecta la flagelina bacteriana e inicia la señalización inmunitaria innata en células epiteliales y en linajes mieloides. Tras la unión del ligando, TLR5 señaliza principalmente a través de MYD88 para activar las cascadas IRAK–TRAF6, culminando en la activación de las vías NF-κB y MAPK y en la inducción de citocinas y quimiocinas proinflamatorias. TLR5 contribuye a la defensa del huésped en mucosas y a la homeostasis entre el microbioma y el sistema inmunitario, y la actividad alterada de TLR5 se ha relacionado con trastornos inflamatorios, susceptibilidad a infecciones e inflamación asociada a tumores. Su respuesta bien definida al ligando convierte a TLR5 en un punto útil para analizar la comunicación cruzada entre PRR, los programas de citocinas y los mecanismos de inmunidad de barrera.
TLR5 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus TLR5 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de TLR5. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de TLR5. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con TLR5 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.