TLR3 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400512-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- TLR3O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase TLR3 (h) e o Plasmídeo Double Nickase TLR3 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para TLR3. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:TLR3 Anticorpo (TLR3.7): sc-32232
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
TLR3 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400512-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
TLR3 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400512-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O receptor do tipo Toll 3 (TLR3) é um receptor endossomal de reconhecimento de padrões que detecta RNA de dupla fita derivado de vírus ou de células danificadas e inicia a sinalização da imunidade inata. Após a ligação ao ligante, o TLR3 sinaliza principalmente por meio do adaptador TRIF para ativar respostas de interferon tipo I mediadas por IRF3/IRF7 e programas transcricionais inflamatórios dependentes de NF-κB. Essa via regula a produção de citocinas e quimiocinas, a apresentação de antígenos e a comunicação com a imunidade adaptativa, influenciando a defesa antiviral e a homeostase imunológica. Alterações na atividade do TLR3 têm sido associadas à suscetibilidade a infecções virais e a fenótipos inflamatórios e autoimunes, e o TLR3 é frequentemente investigado em estudos de neuroinflamação e do microambiente imune tumoral.
TLR3 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus TLR3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de TLR3. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função TLR3. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com TLR3 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.