TGIF2 Lentiviral Activation Particles (h): sc-416231-LAC

TGIF2 (TG-interacting factor 2) kodiert einen Homeobox-Transkriptionsregulator der TALE-Klasse, der vor allem als transkriptioneller Korepressor und als kontextabhängiger Modulator der SMAD-abhängigen Signalübertragung wirkt. Durch die Interaktion mit Komponenten des TGF-β/Activin-Signalwegs und die Rekrutierung chromatinmodifizierender Komplexe trägt TGIF2 dazu bei, Transkriptionsprogramme zu formen, die Zellschicksalsentscheidungen, Differenzierung und Proliferation steuern. Die Aktivität von TGIF2 wird außerdem mit der Regulation der Entwicklungsmusterbildung und epithelial–mesenchymaler Transitionen über genregulatorische Netzwerke in Verbindung gebracht, die Signalgebung und Chromatinzustand integrieren. Eine fehlregulierte TGIF2-Expression oder ein verändertes Gleichgewicht in den beteiligten Signalwegen wurde mit aberranten Entwicklungsphänotypen assoziiert und in Modellen der onkogenen transkriptionellen Reprogrammierung sowie der Tumorprogression untersucht.

TGIF2 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente TGIF2-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

TGIF2 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der TGIF2-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen TGIF2-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen TGIF2-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.