Plasmide Double Nickase (h) TFIIIC90: sc-411269-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) TFIIIC90 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide TFIIIC90 Double Nickase (h) et le plasmide TFIIIC90 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant GTF3C4. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) TFIIIC90 | sc-411269-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) TFIIIC90 | sc-411269-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le gène humain **GTF3C4** code **TFIIIC90**, une sous-unité centrale du complexe **TFIIIC** qui reconnaît des éléments promoteurs internes au sein des gènes transcrits par l’ARN polymérase III, notamment les **ARNt** et d’autres petits ARN non codants. En favorisant l’assemblage de la machinerie de préinitiation de Pol III et en influençant l’organisation de la chromatine aux loci Pol III, TFIIIC90 contribue à l’homéostasie des petits ARN, à la capacité de traduction et, plus largement, à la coordination des réseaux transcriptionnels. La régulation dépendante de TFIIIC s’articule avec le contrôle de la croissance cellulaire, les réponses au stress et l’architecture du génome via ses rôles au niveau des éléments répétitifs et des fonctions de type barrière/isolateur dans certains contextes génomiques. Une dérégulation des programmes transcriptionnels de Pol III et des composants de TFIIIC a été associée à des phénotypes prolifératifs et à une altération du métabolisme des ARN, faisant de TFIIIC90 une cible utile pour des études mécanistiques dans des voies liées au cancer et à la ribostasie.
TFIIIC90 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus GTF3C4 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de GTF3C4. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de GTF3C4. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de GTF3C4.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.