Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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tetranectin CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m): sc-423429
- Zielspezies: mouse
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- tetranectin Das CRISPR/Cas9-Knockout (KO)-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, von denen jedes für die Cas9-Nuklease und eine zielspezifische 20-nt-Guide-RNA (gRNA) kodiert, die für maximale Knockout-Effizienz unter Verwendung von Sequenzen aus der GeCKO v2-Bibliothek entwickelt wurde
- gRNA-Sequenzen lenken Cas9 so, dass es ortsspezifische Doppelstrangbrüche (DSBs) im tetranectin-Genomlokus induziert, was zu einem Gen-Knockout durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ) führt
- Die Puromycin-Resistenz- und RFP-Gene werden von LoxP-Stellen flankiert, was die Entfernung der Selektionsmarker mittels Cre-Rekombinase (Cre-Vektor: sc-418923) nach der Etablierung stabiler Knockout-Zelllinien ermöglicht
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: tetranectin: sc-376940
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
tetranectin CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m) | sc-423429 | 20 µg | $397.00 |
Übersicht
Das murine Clec3b kodiert Tetranectin, ein sezerniertes C‑Typ‑Lektin‑ähnliches Protein, das in extrazellulären Flüssigkeiten und matrixassoziierten Kompartimenten vorkommt. Tetranectin bindet Plasminogen und wird mit der Regulation perizellulärer Proteolyse, der Fibrinolyse und dem Umbau der extrazellulären Matrix in Verbindung gebracht – Prozesse, die Zellmigration und Gewebereparatur beeinflussen. Über seine Interaktionen mit Proteasesystemen und Matrixkomponenten kann Tetranectin inflammatorische und stromale Mikroumgebungen modulieren und wurde im Zusammenhang mit Tumorinvasion, Wundheilung und fibrotischem Remodeling untersucht. Eine veränderte CLEC3B‑Expression bzw. Proteinmenge wurde in mehreren Krankheitskontexten beschrieben, was seine Nutzung als mechanistischer Knotenpunkt zur Untersuchung des proteolytischen Gleichgewichts und der Matrixdynamik unterstützt.
Das tetranectin CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des Clec3b-Gens in mouse-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des Clec3b-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.
Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von Clec3b nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die tetranectin-Proteinexpression aufheben.
Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von Clec3b-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der tetranectin-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.
Hauptmerkmale
- sgRNAs, die auf Clec3b-Exone abzielen, die für die tetranectin-Funktion entscheidend sind
Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
Pool von Plasmiden, die auf mehrere Clec3b-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion
Designvarianten
CRISPRs +/- HDRs
- gRNAs, die vom tetranectin CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) und vom tetranectin CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des Clec3b-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das tetranectin HDR-Plasmid (m) und tetranectin HDR-Plasmid (m2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von Clec3b-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten Clec3b-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.