TETRAN Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-411436

Visão geral

O MFSD10 codifica a TETRAN, uma proteína de membrana multipasse que se acredita participar de processos relacionados ao transporte de solutos e à homeostase de membranas, em consonância com sua pertença à superfamília dos “major facilitator” (MFS). Como um fator putativo do tipo transportador, a TETRAN é de interesse para estudos de tráfego do sistema endomembranar, função de organelas e adaptação metabólica celular, nos quais alterações no fluxo de pequenas moléculas podem modular a sinalização de estresse e programas transcricionais subsequentes. Alterações na expressão de MFSD10 foram relatadas em conjuntos de dados transcriptômicos em múltiplos contextos de doença, sustentando a investigação de sua contribuição para metabolismo desregulado e transições de estado celular. Definir a função da TETRAN pode ajudar a esclarecer como redes de transporte de membrana influenciam fenótipos de proliferação, sobrevivência e diferenciação em células humanas.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO TETRAN (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene MFSD10 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do MFSD10, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do MFSD10 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína TETRAN.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de MFSD10 para a investigação da sinalização de TETRAN, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) MFSD10 críticos para a função TETRAN
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos MFSD10 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo TETRAN Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo TETRAN Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus MFSD10. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo TETRAN Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR TETRAN (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia MFSD10 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo MFSD10 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.