TET2 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-431916-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- TET2O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase TET2 (m) e o Plasmídeo Double Nickase TET2 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Tet2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
TET2 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-431916-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
TET2 Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-431916-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene Tet2 do camundongo codifica a dioxigenase TET2, um regulador-chave do reprogramamento epigenético que catalisa a oxidação da 5-metilcitosina em 5-hidroximetilcitosina e derivados subsequentes, moldando assim a dinâmica de desmetilação do DNA. A atividade de TET2 influencia a acessibilidade da cromatina e programas transcricionais que governam a autorrenovação de células-tronco e progenitoras hematopoéticas, o comprometimento de linhagem e a diferenciação de células imunes. Por meio da integração com vias de manutenção da metilação do DNA e de modificação da cromatina, TET2 ajuda a coordenar a função de enhancers e a expressão gênica responsiva a citocinas. A alteração da função de Tet2 é amplamente usada para modelar o controle epigenético desregulado relevante para mecanismos de doenças hematológicas e inflamatórias in vivo e em sistemas baseados em células.
TET2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Tet2 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Tet2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Tet2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Tet2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.