TESK2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m): sc-432964

Übersicht

Die testisassoziierte Kinase 2 (TESK2), kodiert durch das Mausgen *Tesk2*, ist eine Serin/Threonin-Kinase, die die Dynamik des Aktinzytoskeletts reguliert, indem sie Cofilin phosphoryliert und hemmt und dadurch den Filamentumsatz, die Zellform und die Motilität beeinflusst. Die TESK2-Aktivität verknüpft übergeordnete Signale, einschließlich Signalwegen der Rho-Familie von GTPasen, mit Prozessen des zytoskelettalen Remodellings, die Adhäsion, Migration und vesikulären Transport beeinflussen. Die Expression ist in Hodengeweben und Keimzellen angereichert, was Rollen in der Spermatogenese und der zytoskelettalen Reorganisation während der Reifung von Keimzellen unterstützt. Fehlregulierte TESK2-Signalgebung und cofilinabhängiges Aktin-Remodelling werden häufig in Modellen veränderter Zellmigration und Gewebearchitektur untersucht und sind daher relevant für mechanistische Studien zu Entwicklungs- und proliferativen Störungen.

Das TESK2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des Tesk2-Gens in mouse-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des Tesk2-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von Tesk2 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die TESK2-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von Tesk2-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der TESK2-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf Tesk2-Exone abzielen, die für die TESK2-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere Tesk2-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom TESK2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) und vom TESK2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des Tesk2-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das TESK2 HDR-Plasmid (m) und TESK2 HDR-Plasmid (m2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von Tesk2-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten Tesk2-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.