TERT Lentiviral Activation Particles (m): sc-423341-LAC

Das Mausgen **Tert** kodiert die Telomerase-Reverse-Transkriptase (TERT), die katalytische Untereinheit der Telomerase, welche telomerische DNA‑Repeats synthetisiert, um während der Zellteilung die Integrität der Chromosomenenden zu erhalten. Die TERT‑Aktivität unterstützt die Replikationsfähigkeit und beeinflusst die Genomstabilität, indem sie die Telomerverkürzung begrenzt; dadurch wirkt sie sich auf zelluläre Seneszenz, die Selbsterneuerung von Stammzellen und das proliferative Potenzial aus. Über die Telomerverlängerung hinaus wurde TERT mit DNA‑Schadensantworten und Transkriptionsprogrammen in Verbindung gebracht, die mit der Zellzyklusregulation und Stresssignalwegen verknüpft sind. Eine fehlregulierte Telomerase-Biologie ist für Modelle des Alterns, der Geweberegeneration und der onkogenen Transformation von breiter Bedeutung, da Telomererhalt und chromosomale Stabilität entscheidende Determinanten des Phänotyps sind.

TERT Lentivirale Aktivierungspartikel (m) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente Tert-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

TERT Lentivirale Aktivierungspartikel (m) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der Tert-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen TERT-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen Tert-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.