Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
TEM1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-427713
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- TEM1 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico TEM1, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: TEM1 Anticuerpo (G-9): sc-377221
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
TEM1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-427713 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
Cd248 codifica el marcador endotelial tumoral 1 (TEM1), una glicoproteína transmembrana de tipo I enriquecida en pericitos activados, fibroblastos del estroma y células mesenquimales asociadas a la vasculatura. En tejidos de ratón, TEM1 contribuye a las interacciones célula–matriz y a la remodelación perivascular, integrando señales vinculadas a la organización de la matriz extracelular, la dinámica de adhesión y programas migratorios que sustentan microambientes angiogénicos y fibróticos. La expresión de Cd248 se asocia con frecuencia con la activación del estroma en contextos inflamatorios y neoplásicos, donde una comunicación alterada entre pericitos y endotelio puede influir en la estabilización de los vasos y la remodelación tisular. En consecuencia, Cd248 se estudia ampliamente en modelos de biología del estroma tumoral, reparación de heridas y vías relacionadas con la fibrosis.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO TEM1 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Cd248 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Cd248 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Cd248 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína TEM1.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Cd248 para la investigación de la señalización de TEM1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Cd248 críticos para la función de TEM1
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Cd248 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido TEM1 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido TEM1 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Cd248. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR TEM1 (m) y el plásmido HDR TEM1 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Cd248 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Cd248 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.