TECPR2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-411378

Descripción general

TECPR2 (tectonin beta-propeller repeat containing 2) codifica una gran proteína andamiaje citosólica implicada en el tráfico de membranas relacionado con la autofagia y en la proteostasis. A través de interacciones con la maquinaria de la autofagia, TECPR2 favorece el manejo de la carga y pasos de transporte vesicular que influyen en la eliminación de proteínas mal plegadas y orgánulos dañados, procesos centrales para la homeostasis neuronal. La alteración genética de TECPR2 se ha asociado con fenotipos del neurodesarrollo y neurodegenerativos, en consonancia con un papel en el mantenimiento de tipos celulares de larga vida con alta demanda de proteostasis. Por lo tanto, TECPR2 es relevante para estudiar la regulación de la autofagia, el tráfico intracelular y las vías de respuesta al estrés en modelos celulares humanos.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO TECPR2 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen TECPR2 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del TECPR2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de TECPR2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína TECPR2.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en TECPR2 para la investigación de la señalización de TECPR2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de TECPR2 críticos para la función de TECPR2
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de TECPR2 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido TECPR2 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido TECPR2 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus TECPR2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR TECPR2 (h) y el plásmido HDR TECPR2 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología TECPR2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana TECPR2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.