Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
TCP-1 ζ Double Nickase Plasmid (h): sc-403047-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das TCP-1 ζ Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- TCP-1 ζ Double-Nickase-Plasmid (h) und TCP-1 ζ Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf CCT6A abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
TCP-1 ζ Double Nickase Plasmid (h) | sc-403047-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
TCP-1 ζ Double Nickase Plasmid (h2) | sc-403047-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CCT6A kodiert die menschliche TCP-1-ζ-(Zeta-)Untereinheit des TRiC/CCT-Chaperonin-Komplexes, einer ATP-abhängigen Faltungsmaschine, die die Reifung eines breiten Spektrums zytosolischer Proteine unterstützt. TRiC/CCT trägt zur Proteostase bei, indem es die korrekte Faltung von Aktin, Tubulin und anderen komplexen Multidomänen-Substraten fördert und dadurch die Organisation des Zytoskeletts, den Zellzyklusverlauf und die Anpassung an Stress beeinflusst. Indem TCP-1 ζ die Stabilität und den funktionellen Zusammenbau zentraler Signal- und Strukturproteine mitbestimmt, verknüpft es chaperonvermittelte Proteinfaltung mit Signalwegen, die Proliferation und zelluläre Homöostase steuern. Eine Fehlregulation von TRiC/CCT-Komponenten, einschließlich CCT6A, wurde im Kontext von Proteostase-Ungleichgewichten und aberranten Wachstumsphänotypen untersucht, die für die Krebs- und Neurodegenerationsforschung relevant sind.
TCP-1 ζ Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des CCT6A-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von CCT6A abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die CCT6A-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit CCT6A-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.