TCF-19 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-404549
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- TCF-19 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico TCF-19, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:TCF-19 Anticorpo (H-2): sc-390923
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
TCF-19 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-404549 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
TCF19 (fator de transcrição 19) codifica o TCF-19, uma proteína nuclear ligante de DNA enriquecida em células proliferativas e associada a programas de controle transcricional que coordenam a progressão do ciclo celular. Tem sido associado à regulação de genes envolvidos na replicação do DNA e na entrada na fase S, sustentando vias que acoplam a dinâmica da cromatina a sinais de crescimento. Alterações na expressão de TCF19 foram relatadas em múltiplos contextos tumorais e também são implicadas, por estudos genéticos e funcionais, em fenótipos imunes e metabólicos, incluindo suscetibilidade a doenças autoimunes. Essas conexões tornam o TCF-19 um alvo útil para dissecar redes transcricionais que influenciam a proliferação, a manutenção do genoma e a sinalização inflamatória.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO TCF-19 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene TCF19 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do TCF19, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do TCF19 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína TCF-19.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de TCF19 para a investigação da sinalização de TCF-19, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) TCF19 críticos para a função TCF-19
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos TCF19 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo TCF-19 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo TCF-19 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus TCF19. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo TCF-19 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR TCF-19 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia TCF19 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo TCF19 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.