TCF-19 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-404549

概要

TCF19（transcription factor 19）は、核内DNA結合タンパク質であるTCF-19をコードしており、増殖性の高い細胞で豊富に発現し、細胞周期の進行を協調させる転写制御プログラムに関与するとされています。DNA複製やS期への進入に関わる遺伝子の制御との関連が報告されており、クロマチン動態と増殖シグナルを結び付ける経路を支持します。TCF19の発現異常は複数の腫瘍で報告されているほか、免疫および代謝に関する表現型（自己免疫疾患への感受性を含む）についても、遺伝学的・機能的研究から関与が示唆されています。これらの知見から、TCF-19は、増殖、ゲノム維持、炎症性シグナル伝達に影響する転写ネットワークを解析するうえで有用な標的となります。

TCF-19 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるTCF19遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、TCF19内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、TCF19のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、TCF-19タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、TCF-19シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、TCF19欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• TCF-19の機能に不可欠なTCF19エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、TCF19ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• TCF-19 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびTCF-19 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、TCF19遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  TCF-19 HDRプラスミド（h）および TCF-19 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはTCF19ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のTCF19標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。