Plasmide Double Nickase (m) TBX2: sc-423279-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) TBX2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide TBX2 Double Nickase (m) et le plasmide TBX2 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Tbx2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: TBX2 Antibody (D-3): sc-514291
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| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) TBX2 | sc-423279-NIC | 20 µg | $410.00 |
Le gène murin *Tbx2* code le facteur de transcription de la famille T-box TBX2, un régulateur se liant à l’ADN de manière spécifique à la séquence, qui façonne la mise en place des patrons embryonnaires et l’organogenèse, notamment le développement des membres et du cœur. TBX2 agit principalement comme répresseur transcriptionnel et s’interface avec les programmes du cycle cellulaire et de différenciation en modulant des inhibiteurs des CDK ainsi que des réseaux de signalisation du développement, tels que les voies BMP et Wnt. Une activité altérée de TBX2 a été associée à une prolifération dérégulée et à des défauts de spécification de lignage, ce qui en fait un nœud pertinent pour l’étude des circuits de régulation génique du développement. Dans des contextes de recherche liés aux maladies, TBX2 est fréquemment étudié pour ses rôles dans des programmes transcriptionnels oncogéniques, le contournement de la sénescence et la plasticité des cellules tumorales dans des systèmes modèles.
TBX2 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Tbx2 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Tbx2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Tbx2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Tbx2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.