TBX19 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-406919

Übersicht

TBX19 (T‑Box-Transkriptionsfaktor 19, auch als TPIT bekannt) ist ein linienrestriktiver Transkriptionsfaktor, der für die Festlegung und Aufrechterhaltung der Identität hypophysärer Kortikotrophen erforderlich ist. Er reguliert Genexpressionsprogramme, die die Transkription von Proopiomelanocortin (POMC) und die nachgeschaltete Signalübertragung der Hypothalamus‑Hypophysen‑Nebennierenrinden‑Achse steuern, und ist dabei in umfassendere, T‑Box‑abhängige Entwicklungswege eingebunden. Indem TBX19 die endokrine Differenzierung und die Funktion hormonproduzierender Zellen prägt, wird er in Studien zur Organogenese der Hypophyse und zur transkriptionellen Kontrolle häufig als Marker und mechanistischer Knotenpunkt verwendet. Eine veränderte TBX19‑Aktivität wurde mit gestörter Kortikotrophenfunktion und kongenitalen endokrinen Phänotypen in Verbindung gebracht, was seine Relevanz für krankheitsmodellierende Forschung zur Hypophyseninsuffizienz unterstreicht.

Das TBX19 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des TBX19-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des TBX19-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von TBX19 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die TBX19-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von TBX19-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der TBX19-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf TBX19-Exone abzielen, die für die TBX19-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere TBX19-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom TBX19 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom TBX19 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des TBX19-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das TBX19 HDR-Plasmid (h) und TBX19 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von TBX19-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten TBX19-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.