Plasmide Double Nickase (h) Tau: sc-400136-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Tau correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Tau Double Nickase (h) et le plasmide Tau Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant MAPT. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Tau Antibody (D-8): sc-166060
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Tau | sc-400136-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Tau | sc-400136-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MAPT code la protéine humaine tau associée aux microtubules, une protéine neuronale qui stabilise et organise les réseaux de microtubules afin de soutenir le transport axonal, l’extension des neurites et la plasticité du cytosquelette. La fonction de tau est régulée par des modifications post-traductionnelles, notamment la phosphorylation, qui modulent sa liaison aux microtubules et influencent le trafic dépendant du cytosquelette ainsi que les réponses au stress. Un dérèglement de l’homéostasie de tau et son agrégation sont associés aux tauopathies et, plus largement, à la biologie des maladies neurodégénératives, où l’altération de la dynamique des microtubules et de la protéostasie se conjugue à un dysfonctionnement synaptique. MAPT est donc largement étudié dans les voies qui gouvernent la polarité neuronale, le remodelage du cytosquelette et le contrôle qualité des protéines.
Tau Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus MAPT dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de MAPT. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de MAPT. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de MAPT.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.