TARM1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-434122

概要

Tarm1 は、主として骨髄系細胞に発現する免疫受容体である TARM1 をコードしており、自然免疫の活性化を調節し得る細胞表面シグナル伝達分子として機能します。TARM1 は、サイトカイン産生、炎症性シグナル伝達カスケード、ならびに好中球・マクロファージ・その他の白血球集団間のクロストークに影響する、受容体駆動型経路に関与します。TARM1 に関連するシグナル伝達の制御異常は、炎症や宿主防御に関わる免疫調節異常の状況と関連づけられており、マウス免疫学モデルにおける機序解析研究の有用な標的となっています。

TARM1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるTarm1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Tarm1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Tarm1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、TARM1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、TARM1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Tarm1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• TARM1の機能に不可欠なTarm1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Tarm1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• TARM1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびTARM1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Tarm1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  TARM1 HDRプラスミド（m）および TARM1 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはTarm1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のTarm1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。