Tankyrase-2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-403925

概要

TNKS2はタンキラーゼ2をコードしており、PARPファミリーに属するポリ（ADP-リボース）ポリメラーゼ（PARP）で、PAR化（PARylation）依存的な分解（ターンオーバー）を介してタンパク質の安定性やシグナル伝達を制御します。タンキラーゼ2はAXINなどの基質のユビキチン介在性分解を促進し、その結果としてWnt/β-カテニン経路の活性および増殖・分化を制御する下流の転写プログラムを調節します。また、TRF1との相互作用を介してテロメア維持にも関与し、さらに有糸分裂の進行や紡錘体の組織化にも影響を及ぼします。タンキラーゼ活性の異常は、がん化（腫瘍化）やその他の増殖性病態に関連する、異常なWntシグナル伝達やゲノム維持機構の破綻と結び付けられています。

Tankyrase-2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるTNKS2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、TNKS2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、TNKS2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Tankyrase-2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Tankyrase-2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、TNKS2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Tankyrase-2の機能に不可欠なTNKS2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、TNKS2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Tankyrase-2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびTankyrase-2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、TNKS2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Tankyrase-2 HDRプラスミド（h）および Tankyrase-2 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはTNKS2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のTNKS2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。